-
細(xì)胞融合的方法及誘導(dǎo)物
發(fā)布時(shí)間: 2023-04-19 點(diǎn)擊次數(shù): 1205次同種細(xì)胞在培養(yǎng)時(shí)2個(gè)靠在一起的細(xì)胞自發(fā)合并,稱自發(fā)融合;異種間的細(xì)胞必須經(jīng)誘導(dǎo)劑處理才能融合,稱誘發(fā)融合。
仙臺(tái)病毒法融合
①兩種細(xì)胞在一起培養(yǎng),加入病毒,在4℃條件下病毒附著在細(xì)胞膜上。并使兩細(xì)胞相互凝聚;
②在37℃中,病毒與細(xì)胞膜 發(fā)生反應(yīng),細(xì)胞膜受到破環(huán),此時(shí)需要Ca2+和Mg2+,最適PH為8.0一8.2;
②細(xì)胞膜連接部穿通,周邊連接部修復(fù),此時(shí)需Ca2+和ATP;
④融合成巨大細(xì)胞,仍需ATP 。
聚乙二醇(PEG)法
聚乙二醇(PEG)結(jié)構(gòu)為:HOH2C(CH20CH2)nCH2OH,分子 量大于200小于6000者均可用作細(xì)胞融合劑。PEG經(jīng)高壓滅菌后,與溫?zé)岬腅ngle氏液混合。通常用分子 量低于1000的PEG作融合劑最好,50%PEG溶液能產(chǎn)生最多雜交細(xì)胞。PEG溶液在pH6.0時(shí)細(xì)胞融合率最高。
電融合法
在直流電脈沖的誘導(dǎo)下,細(xì)胞膜表面的氧化還原電位發(fā)生改變,使異種細(xì)胞粘合并發(fā)生質(zhì)膜瞬間破裂,進(jìn)而質(zhì)膜開始連接,直到閉和成完整的膜,形成融合體。
優(yōu)點(diǎn):融合率高、重復(fù)性強(qiáng)、對(duì)細(xì)胞傷害小;
裝置精巧、方法簡(jiǎn)單、可在顯微鏡下觀察或錄像觀察融合過(guò)程;
免去PEG誘導(dǎo)后的洗滌過(guò)程、誘導(dǎo)過(guò)程可控性強(qiáng)。
融合誘導(dǎo)物
細(xì)胞融合的誘導(dǎo)物種類很多.常用的主要有生物法用滅活的仙臺(tái)病毒(Sendai virus),化學(xué)法如用聚乙二醇(Polyethyleneglycol,PEG)和物理法如電脈沖。目前應(yīng)用比較廣泛的是聚乙二醇,因?yàn)樗椎?、?jiǎn)便,且融合效果穩(wěn)定。PEG的促融機(jī)制尚不全部清楚,它可能引起細(xì)胞膜中磷脂的酰鍵及極性基團(tuán)發(fā)生結(jié)構(gòu)重排。動(dòng)植物 細(xì)胞融合方法不同,生物法利用滅活仙臺(tái)病毒是動(dòng)物細(xì)胞融合所*的。
自發(fā)條件下或人工誘導(dǎo)下, 兩個(gè)不同基因型的細(xì)胞或原生質(zhì)體融合形成一個(gè)雜的細(xì)胞。基本過(guò)程包括細(xì)胞融合導(dǎo)致異核體(heterokaryon)的形成, 異核體通過(guò)細(xì)胞有絲分裂導(dǎo)致核的融合, 形成單核的雜的細(xì)胞。有性生殖時(shí)發(fā)生正常的細(xì)胞融合, 即由兩個(gè)配子融合成一個(gè)合子。
細(xì)胞融合不僅可用于基礎(chǔ)研究,而且還有重要的應(yīng)用價(jià)值,在植物育種方面已經(jīng)成功的有蘿卜+甘藍(lán)、粉藍(lán)煙草+郎氏煙草、番茄+馬鈴薯等等。細(xì)胞融合另一個(gè)重要應(yīng)用就是制備單克隆抗體,單克隆抗體可以用作診斷試劑,治療疾病和運(yùn)載藥物,具有準(zhǔn)確,高效,簡(jiǎn)易,快速等優(yōu)點(diǎn)。
深圳安培生物科技有限公司,是一家具有核心的技術(shù)實(shí)力、壹流的經(jīng)營(yíng)管理水平和完善的市場(chǎng)銷售體系的生物高科技企業(yè)。總部設(shè)在廣東,服務(wù)面向全國(guó)。安培生物集進(jìn)口試劑、實(shí)驗(yàn)室耗材銷售、技術(shù)服務(wù)與合約開發(fā)為一體的專業(yè)化高科技公司,旨在為生命科學(xué)的發(fā)展提供壹流的產(chǎn)品與服務(wù)。本公司建立了涵蓋分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)、信號(hào)傳導(dǎo)和神經(jīng)科學(xué)等領(lǐng)域的產(chǎn)品供應(yīng)線,在各個(gè)領(lǐng)域內(nèi)向用戶提供世界前沿水平和質(zhì)量穩(wěn)定的產(chǎn)品,安培生物致力于為廣大的科研機(jī)構(gòu)、高等院校等優(yōu)質(zhì)客戶提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品、技術(shù)支持與服務(wù)。
- 下一篇:從有限的細(xì)胞中提取 RNA
- 上一篇:大腸桿菌質(zhì)粒DNA的提取
-
血清系列
-
細(xì)胞轉(zhuǎn)染
-
支原體清除
-
細(xì)胞凍存
-
實(shí)驗(yàn)耗材
-
分子試劑
-
細(xì)胞增殖與凋亡
-
Biozellen系列
-
培養(yǎng)基
-
ELISA試劑盒
-
TOYOBO(東洋紡)
-
ZYMO RESEARCH
-
Greiner(格瑞納)
-
IKA(艾卡)
-
化學(xué)發(fā)光底物(ECL)
-
PROSPEC系列
-
Epigentek系列
-
微生物檢測(cè)
-
細(xì)胞生物學(xué)
-
Corning康寧
-
解離試劑
-
細(xì)胞類-實(shí)驗(yàn)耗材
-
原代細(xì)胞
-
植物檢測(cè)系列試劑盒
-
SERANA
-
細(xì)胞系
-
生化試劑盒
-
環(huán)境檢測(cè)系列試劑盒(AKEN)
-
類器官培養(yǎng)
-
緩沖器和解決方案
-
生物三凝膠基質(zhì)
-
細(xì)胞因子分子
-
生物樣本庫(kù)